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        怎樣提高電子顯微鏡分辨率

        文章出處:網責任編輯:作者:人氣:-發表時間:2018-01-08 10:28:00
            顯微鏡的分辨率應該怎樣提高?想了解自己所使用的顯微鏡操作方法是否正確,沃德普儀器官網一切關于顯微鏡的問題,應有盡有,如果沒有您需要解決的問題,可以直接咨詢沃德普儀器客服人員,今天沃德普儀器給大家介紹的是怎樣提高電子顯微鏡的分辨率。
         
            顯微鏡是實驗室最重要的設備之一,而評價光學顯微鏡及電子顯微鏡性能的重要指標都是分辨率。 
         
        1、顯微鏡的分辨率 
         
            分辨率是指能清楚地分辨兩個小點或兩線間的最小距離。人眼本身就是一臺顯微鏡,在標準照明條件下,人眼在明視距離(國際公認為25cm)上的分辨率約等于1/10mm。對于觀察兩條直線來說,由于直線能刺激一系列神經細胞,眼睛的分辨率還能提高一些,這就是顯微鏡的分劃板使用雙線對準的原理所在。 
         
            人眼的分辨率只有1/10mm,那么比1/10mm小的物體或比1/10mm近的兩個微小物體的距離,人眼就無法分辨了。這時人們開始研制出放大鏡和顯微鏡,顯微鏡的分辨率定義是指在標本上能清楚分辨的兩個小點之間的最小距離。
         
            其計算公式為: D=0.61λ/N.A. 
         
            式中:D為分辨率(μm);λ為光源波長(μm) ;N.A為物鏡的數值口徑(也稱鏡口率)。 
         
        2、光學、電子顯微鏡分辨率的區別及提高 
         
        (1)光學顯微鏡與電子顯微鏡分辨率的區別
         
            電子顯微鏡是顯微光學一次革命,它使顯微光學的最小分辨間距從0.2um提高到0.2~0.3納米,使人類能夠看到一排排原子陣列的晶格結構,從而極大地提高了人類研究微觀世界的能力,而光學顯微鏡和電子顯微鏡最大分辨率不同的原理是所使用波長不同,前者使用可見光,分辨率最高達0.1微米級,最高放大倍率只能到1600倍左右。后者使用電子,根據物質波波長理論,在幾十千伏至幾百千伏的電壓加速下,可使電子顯微鏡的分辨率達到納米級,比光學顯微鏡的分辨率高千倍。 
         
        (2)提高光學顯微鏡和電子顯微鏡分辨率的方法 
         
            提高光學顯微鏡分辨率的方法
         
            根據分辨率的計算公式:D=0.61λ/N.A.,可知提高光學顯微鏡分辨率的方法有三種:
         
         ①減低波長??梢姽庾疃滩ㄩL0.39μm,若用0.13μm的紫外線作光源,則會比普通顯微鏡提高3倍以上??墒怯捎谧贤饩€顯微鏡的透鏡材料需特殊材質(透過紫外線的材料)制造,加之紫外線顯微鏡不能用肉眼直接觀察,只能通過攝制顯微鏡照片進行分析,這樣就限制了紫外線顯微鏡的應用。
         
         ②增大折射率。一般顯微鏡的物鏡分為低倍物鏡(2×、4×、10×等)、高倍物鏡(40×、45×等)、水浸物鏡(63×)、油浸物鏡(90×、100×)等。低倍物鏡也叫干燥系物鏡,其介質是空氣,折射率是1;水浸物鏡介質是蒸餾水,其折射率為1.33;油浸物鏡介質是香柏油或其它透明油,其折射率一般在1.52左右,接近透鏡和載玻片的折光率。水浸物鏡和油浸物鏡不僅放大倍數高而且由于使用高折射率的介質,分辨率也高。
         
         ③加大物鏡的鏡口率來提高分辨力。數值孔徑(鏡口率)公式為:N.A=n.sinα式中:n—物鏡與標本之間的介質析射率;α—物鏡的鏡口角。如低倍物鏡指1×~6×, NA值為0.04~0.15;中倍物鏡指6×~25×,NA值為0.15~0.40;高倍物鏡指25×~63×,NA值為0.35~0.95;而油浸物鏡指90×~100×,NA值可達1.25~1.40。由此可見,那NA值越大,說明顯微鏡物鏡的鏡口率越大,D值越小,分辨力越高,物象越清楚。 
         
            如何提高電子顯微鏡分辨率 
         
            電子顯微鏡就是利用短光波來提高分 辨力以檢視較小物體的。物鏡分辨力的高低與造象是否清楚有密切的關系。而目鏡沒有這種性能,因為目鏡只放大物鏡所造的象。為此,提高電子顯微鏡放大率的方法可從以下幾個方面考慮:
         
         ①保持良好的加速電壓。加速電壓不能很低,正常應保持在20~30KV。
         
         ②盡量縮短工作距離。工作距離不能太大,一般保持在5~8mm,以縮短探頭接收信號的距離。
         
         ③保持好樣品的傾斜度,樣品傾斜10~150,使二次電子發射及接收的多。
         
         ④聚光鏡放在600~650左右,(數值越大,束斑尺寸越小,分辨率越高)。
         
         ⑤對中良好,保證電子束對中,信號強,亮度好。
         
         ⑥及時更換新的燈絲,使燈絲飽和,束流穩定,并使束流值保持在100~150。
         
         ⑦物鏡光闌合軸好(特征點在2000X倍以上時,基本同心聚焦散焦)。
         
         ⑧延長抽真空的時間以提高真空度(一般在30分鐘以上基本達到平衡)或檢查真空系統的密封狀態。
         
         對于提高顯微鏡分辨率的方法,不同類型的顯微鏡,方法是不一樣的,大家不應該盲目的去按自己認為的方法去操作,應該選擇合適的方法,可是很多人并不能清楚的了解自己使用的顯微鏡操作方法是否正確,這樣一來就可能損壞到顯微鏡,并且減少顯微鏡的使用壽命,應該怎么辦呢?其實不用擔心,可以咨詢沃德普儀器,沃德普儀器為您提供專業的售前、售中、售后服務,讓您舒心、省心。詳情可聯系沃德普儀器客服人員。
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