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        相差顯微鏡與微分干涉顯微鏡有什么不一樣

        文章出處:網責任編輯:作者:人氣:-發表時間:2018-10-08 11:22:00
            相差顯微鏡與微分干涉差顯微鏡是屬于怎樣的顯微鏡呢,二者是一樣的嗎?其檢測的區別又是怎樣的,下面沃德普儀器就給大家介紹一下相差顯微鏡與微分干涉差顯微鏡。
         
            在相差成像中,圖片的密度區別源于光通過樣品時的路程長短不一?;冶尘罢嗖钕?,那些較厚的區域(光程長)在視野中呈現較周圍暗的效果;相對的,較薄的樣品或折射率低于周圍介質的樣品在視野下則要亮些。
        DIC 與相差成像技術的最根本區別體現在它的光學基礎上。通過比較可知,這兩種“對比增強型”成像效果區別明顯,但同時又有很多相似之處。
          
            在DIC 成像技術中,情況又有些不同。DIC 成像時,決定對比度的首要因素是光通路中的梯度變化(即光波傳播方向上的變化率)。梯度大的區域在視野下對比度高,并呈現出“偽立體”效果——這是DIC 的特征效果;而梯度較小的區域,如扁平的上皮細胞,則不會有很明顯的對比度呈現,而且灰度值通常與背景相同。
         
            DIC顯微鏡的物理原理完全不同于相差顯微鏡,技術設計要復雜得多。DIC利用的是偏振光,有四個特殊的光學組件:偏振器(polarizer)、DIC棱鏡、DIC滑行器和檢偏器。偏振器直接裝在聚光系統的前面,使光線發生線性偏振。在聚光器中則安裝了石英棱鏡,即DIC棱鏡,此棱鏡可將一束光分解成偏振方向不同的兩束光(x和y),二者成一小夾角。聚光器將兩束光調整成與顯微鏡光軸平行的方向。最初兩束光相位一致,在穿過標本相鄰的區域后,由于標本的厚度和折射率不同,引起了兩束光發生了光程差。在物鏡的后焦面處安裝了第二個棱鏡,即DIC滑行器,它把兩束光波合并成一束。這時兩束光的偏振面(x和y)仍然存在。最后光束穿過第二個偏振裝置,即檢偏器。
         
            在光束形成目鏡DIC影像之前,檢偏器與偏光器的方向成直角。檢偏器將兩束垂直的光波組合成具有相同偏振面的兩束光,從而使二者發生干涉。x和y波的光程差決定著透光的多少。光程差值為0時,沒有光穿過檢偏器;光程差值等于波長一半時,穿過的光達到最大值。于是在灰色的背景上,標本結構呈現出亮暗差。為了使影像的反差達到最佳狀態,可通過調節DIC滑行器的縱行微調來改變光程差,光程差可改變影像的亮度。調節DIC滑行器可使標本的細微結構呈現出正或負的投影形象,通常是一側亮,而另一側暗,這便造成了標本的人為三維立體感,類似大理石上的浮雕。
         
            相差是指同一光線經過折射率不同的介質其相位發生變化并產生的差異。相位指在某一時間上,光的波動所達到的位置。一般由于被檢物體所能產生的相差太小,肉眼很難分辨,只有在變相差為振幅差(明暗差)之后才能被區分。相差決定于光波所通過介質的折射率之差及其厚度,等于折射率與厚度的乘積之差(即光程之差)。而相差顯微鏡就是利用被檢物的光程之差進行鏡檢的。
         
            相較相差,DIC 的主要優勢為不必考慮相差環及聚光鏡環的遮擋,可以實現高數值孔徑的物鏡觀察。這意味著DIC 可以提高軸向分辨率,這在分辨率要求很高的試驗中尤其有意義。
         

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